Proceso y obtencion de marcadores moleculares para determinar el sexo en las plantas de borojo

.1.- Un proceso para obtener unos marcadores moleculares asociados al sexo de especies vegetales, particularmente de la especie borojo (borojoa patinoi cuatrecasas), que comprende un protocolo de pasos a saber:extracción del adn de la especie borojo, efectuar reacciones aflps con dicho adn, separación electroforetica de los productos de las reacciones de aflps, secuenciar los marcadores moleculares asociados al sexo diseñar los iniciadores para diagnosticar el sexo por reacción en cadena de polimerasa pcr.2.- Proceso conforme a la reivindicación 1 en donde la extracción del adn caracterizada por los siguientes pasos:2.1.- Macerar el material vegetal (hojas tiernas) con nitrógeno líquido.2.2.- Lncubar 100 mg de cada muestra con 1.5 Ml de buffer (500 mm de tris, 1.4 M de naci, 2 % de ctab, 0.2 % De mercaptoetanol y 20 mm de edta) de extracción a 65 °c durante 60 minutos, mezclando ocasionalmente por inversión. 2.3.- Completar volumen a 2 mi con cloroformo:alcohol isoamílico 24 : 1 y mezclar por inversión.2.4.- Centrifugar durante 10 minutos a 10.000 Rpm a 4 °c. Separar fase acuosa en otro tubo.2.5.- Repetir el paso 3 y 4.